カートに入れる第2章 実験レポート作成 ワークブック
1 方法
形式
何を使って、どのような操作をしたのかを詳細に書きましょう。1つの実験レポートが複数の実験の組合わせである場合は、小見出しを活用しながら実験ごとに書きます。箇条書きにせず、文章の形で作成します。また、実際に行ったことなので、原則として過去形で書きます。一人称は使用しません。
書くべき内容
材料や操作について、以下の詳細な情報を含めて文章を記述します。
- 材料や試料（生物も含む）の正式名称（できればメーカー名も）
- 特殊なしくみで働く材料や試料の説明
- 装置や器具の正式名称とメーカー名（自作した場合は、自作した方法を1つの実験とみなして書く）
- 実験操作
- 実験条件（温度、濃度、容量、時間、回数など）
- フィールドでの調査や採取を行った場合、場所と状況（天候、潮位、気圧など）
- 解析に使用したソフトや手法
- 顕微鏡写真などの撮影条件
生物試料の名称の表記にはルールがあります。原則、普段使用する名称（通称名）は使用せず、学名や和名（種が特定できる標準和名）を使用します。動物と植物は和名を使用することが多く、原則としてカタカナで表記します。
× かえる → ○ アフリカツメガエル
× しろいぬなずな → ○ シロイヌナズナ
- ＊
- 英語の “mouse” は小型のネズミの仲間を広く表す言葉ですが、生物学分野での「マウス」は、ハツカネズミ Mus musculus 一種を表す名称として使用されます。複数の種を比較する実験など、誤解が生じる可能性がある場合は、学名を併記しましょう。
微生物などは基本的に学名（属名＋種小名）で表記します。学名の表記には原則イタリック体（斜体）を使用し、イタリック体が使用できないときには下線を引きます。さらに、属名の最初の文字を大文字、種小名の最初の文字は小文字にします。サルモネラ属菌など種名が同定できない場合は、属名の後にローマン体（直立体）で「sp.」（複数種の場合は「spp.」）をつけます。動植物でも学名を使用する場合は、同じルールが適用されます。
サルモネラ属菌 Salmonella spp.
また、性別を表記するときは、カタカナか漢字で表記します。
気をつける点・省く内容
不要な情報や事実以外の記述を省きましょう。学生が書いてしまいがちな例を3つ紹介します。
①その方法を用いた目的
②比喩表現や抽象的な表現
③実験を再現するのに必要のない情報
ヒントとコツ
実験中に記録した実験ノートのメモの内容も盛り込んで、誰が見ても再現できるように心がけて書きます。説明書をつくっているつもりで丁寧に書きましょう。論文などですでに発表された方法を用いた場合は、引用したうえで概略を記載します（⇒p.121、ライティングテクニック8参照）。
以下はレポートのダメ例です。どこがダメか考えてみましょう。
・準備
タンパク質の核移行とDNA複製との相関関係を検証するために受精卵を準備します。
- めすのかえるの卵抽出液に精子核染色体を加えた。
- 核膜形成前と核形成後にWGA （核膜形成阻害剤） または、aphidicolin （DNA複製阻害剤）を0.4 µLずつ加えて、さまざまな温度にしばらく置いた。
・染色方法
準備した受精卵にTAの羊土さんが調節した2 µg/mLのCy3-dCTPとGFPタンパク質を3.5 µLずつしっかり混ぜて10分間静置した。今回の実験では染色した受精卵のサンプルを100 ％ メタノールで固定した後、顕微鏡を使って観察した。顕微鏡観察から得られた画像データを用いて、核の大きさと蛍光の強さを解析し、異なる条件間で有意差検定を行った。
・卵抽出液の調整
小見出しは太字にし、可能であれば行間を1.5行など広めにすると、見やすくなります（⇒第2章9参照）。
アフリカツメガエル （○○大学医学部内分泌研究所） の未受精卵をEGTA（ethylene glycol tetraacetic acid）を含む緩衝液とともに遠心管に詰め、150 000 Gで3時間遠心分離し、可溶性分画をM期抽出液として回収した。
・核形成とタンパク質移行の阻害処理
アメリカツメガエルの卵抽出液 60 µLに脱膜した 2×105 個/µLのアメリカツメガエル精子核染色体を 1.2 µL添加後、10 µLずつ 1.5 µLエッペンチューブ6本に分注した。うち3本は、核膜形成前にあたる精子核添加後すぐに、 無処理のまま[サンプル①] 、核膜形成・核移行阻害剤WGA （Wheat Germ Agglutinin; Hitsuji-sha） を添加 [サンプル②]、DNA複製阻害剤
名称とメーカー名を併記する場合は；や，で区切ります。
aphidicolin （Yodo Chemicals）を添加 [サンプル③] し、23 ℃で50分間培養した。また1本は、精子核添加後すぐに氷上 （4 ℃） に移し、50分培養した [サンプル④] 。残りの2本は、精子核添加後23 ℃で40分間培養して核膜を形成させた後、氷上 （4 ℃） [サンプル⑤] 、またはWGAを添加して23 ℃ [サンプル⑥] で10分間培養した。WGAは終濃度が400 µg/mL、aphidicolinは終濃度が20 µg/mLとなるように添加した。
同じ条件を複数回書くときは、最後にまとめて記載しても問題ありません。
・蛍光染色
阻害処理後のサンプルに2 mg/mL GFP蛍光タンパク質 （Exper Bio, Inc.）とcCTPが蛍光で標識された1 mM Cy3-dCTP （Exper Bio, Inc.） を1 µLずつ加え、氷上（4 ℃）にて30分間静置した。GFP蛍光タンパク質とCy3-dCTPを取り込んだサンプル2 µLをスライドガラスにのせた。その後、サンプルに核を染色する1 µg/mL Hoechst 33342 （Exper Bio, Inc.）を含む細胞固定液（4 ％パラホルムアルデヒド）を2 µL添加した。
・蛍光顕微鏡を用いた観察
固定したサンプルは、共焦点顕微鏡 （Y-SP8; Hitsuji Microsystems） を用いて観察、撮影した。Hoechstの観察には、405 nm、GFPでは488 nm、Cy3では561 nmの励起光を照射した。蛍光シグナルは可変フィルターにて検出した。検出フィルターは、Hoechstの検出には430- 475 nm、GFPに
範囲を示すときには [数値 ハイフン 半角スペース 数値 半角スペース 単位] という形式で表記します＊。
- ＊
- 数値範囲はenダッシュで表すのが正式な表記とされます（例：430–475 nm）。ただし、通常の文書作成ソフトではenダッシュの入力が難しいので、ここでは代替手段として多用される表記を紹介しています。
は500- 540 nm、Cy3には565- 600 nmを設定した。画像はすべて256×256 ピクセルで撮像した。
・核の蛍光輝度の測定および統計処理
得られた画像データをImage analysis X（AIX）を用いて解析した。はじめに、核を撮像した画像からHoechst で標識された核領域をThresholdで閾値を決定した後、抽出した。次に、GFPまたはCy3を撮影した画像から抽出済みの核領域を重ね合わせ、核領域内に存在するGFPまたはCy3のシグナル強度を核ごとに算出した。得られたデータはOptical 14（Graph line）を用いて平均±SEMとして示し、Mann-Whitney U検定を用いて有意差検定を行った。
＊自然科学分野では多くの場合、パーセント（％）や摂氏温度（℃）の前にもスペースを入れます（⇒p.90、ライティングテクニック5参照）。