次世代シークエンサーの最注目手法に特化し,研究の戦略,プロトコール,落とし穴を解説した待望の実験書が登場!発現量はもちろん,翻訳解析など発展的手法,各分野の応用例まで,広く深く紹介します.
目次
序【鈴木 穣】
概論:RNA-Seqとは何か? 何ができるのか?【今村聖実,鈴木絢子】
第1章 RNA-Seqの基本 試料調製と発現解析の標準的なプロトコール.
1. Total RNAの抽出【関 真秀,今村聖実】
2. RNAとライブラリーの定量とクオリティコントロール【関 真秀,今村聖実】
3. Stranded mRNA-Seq【金井昭教】
4. RNA-Seqデータのマッピング 遺伝子発現解析を例に【前川 翔,鈴木絢子】
5. miRNAを標的としたRNA-Seq RNA免疫沈降法を中心に【兼松宗太郎】
6. 細胞画分からのRNA-Seq 目的に応じたRNAを解析するために【谷本幸介】
7. 組織サンプルの固定とRNA抽出【山下 聡】
8. ヒト血液検体のトランスクリプトーム解析 ゲノムコホートにおける前処理・輸送・抽出を例に【大桃秀樹,古川亮平,清水厚志】
9. 微量サンプルからのRNA-Seq【関 真秀】
10. RNA-Seq用途別シークエンサーの選び方【近藤直人】
第2章 発展的手法 発現解析以外の発展的手法およびシングルセル解析.
1. CAGE法を用いた転写制御領域の解析【村田光義,末木広美,石山美樹,吉原正仁,伊藤昌可】
2. 転写開始点データベースDBTSSによる転写制御解析【山下理宇】
3. RNA-SeqによるA-to-I RNA編集の検出 【ガリポン ジョゼフィーヌ(Josephine Galipon),石黒 宗,冨田 勝,程 久美子】
4. 3'-seqによる選択的ポリアデニル化の網羅的な解析【今町直登,秋光信佳】
5. リボソームプロファイリングによる細胞内翻訳反応評価【秋光信佳】
6. RNAの合成・分解を定量するシークエンス技術【前川 翔,鈴木 穣】
7. BRIC-Seqによる網羅的なRNA分解速度測定法【秋光信佳】
8. CLIP法とその改良法によるタンパク質結合RNAの高解像度解析【河原行郎】
9. シングルセル①:機器・方法編 C1以外で世界的に開発されている機器・方法について【橋本真一】
10. シングルセル②:試薬・キット編 改変型SMART-Seq2プロトコールを交えて【奥野浩行】
11. シングルセル③:C1システムのプロトコールと実施例【鈴木絢子】
12. 超並列レポーターアッセイによる転写制御解析 【入江拓磨】
第3章 応用例
1. 細菌叢研究におけるRNA-Seq メタトランスクリプトームによる菌種・機能の解析【恒吉桃香,十倉充範,大島健志朗,須田 亙】
2. 免疫研究におけるRNA-Seq システム免疫学へのアプローチ【三野享史,竹内 理】
3. がん研究におけるRNA-Seq がんのシステム異常を情報学的に俯瞰する 【白石友一,新井田厚司,宮野 悟】
4. 神経研究におけるRNA-Seq シングルセルRNA-Seqによる新たな細胞種の発見を例に【岸 雄介】
5. 遺伝性疾患研究におけるRNA-Seq 先天異常症候群における遺伝子発現異常を例に【泉 幸佑】
6. 感染症研究におけるRNA-Seq マラリアの宿主–病原体相互作用を例に【山岸潤也】
第4章 新技術
1. 多様なトランスクリプトーム解析技術【鈴木絢子】
2. PacBio1分子実時間シーケンシング ゲノム,トランスクリプトーム,エピゲノム解析への応用【森下真一】
3. ナノポアシークエンサーMinION 超小型装置によるRNA解析【鈴木絢子,Lucky Runtuwene,阿部佳澄,鈴木 穣】
第5章 インフォマティクスとデータベース
1. マイクロRNA研究を加速するデータベース【木立尚孝】
2. RNA2次構造とRNA間相互作用の予測【浅井 潔】
3. ヒトのオミクス情報を扱うデータベース トランスクリプトームデータベースGTExと東北メディカル・メガバンク事業を例に【山下理宇】
4. FANTOM/ENCODEに関するデータベース・ウェブツール 大規模プロジェクトのデータを利用する【野口修平,粕川雄也,Piero Carninci】
Column
1. RNA-SeqのためのR教育の現状と課題【門田幸二】
2. 頭の痛いノンコーディングRNA【菅野純夫】
3. RNA-Seqはこうして誕生したーそしてデータ再利用へ【坊農秀雅】
4. NGSデータ解析者の苦悩とその解決策【八谷剛史,清水厚志】
索引
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- 【本書名】実験医学別冊:NGSアプリケーション RNA-Seq実験ハンドブック〜発現解析からncRNA、シングルセルまであらゆる局面を網羅!
- 【出版社名】羊土社
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