基本的な実験技術でありながら扱いが難しい“タンパク質精製”に焦点を当て,タンパク質の特性や取扱いの注意点,精製のポイントを解説したTips集です.好評の既刊『検出と定量のコツ』の姉妹版.
目次
序【森山達哉】
第1章 タンパク質の取扱いと抽出のコツ
1.変性・分解を防ぐ取扱いと保存のコツ【森山達哉】
2.動物細胞・組織からの抽出およびオルガネラの分画【森山達哉】
3.植物からの抽出【武田 徹】
4.溶解性の差などを利用した分画抽出【安達 伸】
5.膜タンパク質の可溶化【森山達哉】
6.タンパク質の定量【森山達哉】
第2章 タンパク質精製のコツ(基本編)
1.精製の目的と戦略【森山達哉】
2.タンパク質をモニターする方法【森山達哉】
3.カラムクロマトグラフィーによる精製計画の基本【稲川淳一】
4.各種カラムクロマトグラフィー技術の特徴【稲川淳一】
5.限外濾過膜を用いた濃縮・精製【松井有紀子】
6.電気泳動と純度検定【安達 伸】
第3章 タンパク質精製のコツ(応用編)
1.微量タンパク質の精製・取扱い【長野光司】
2.電気泳動を用いた分離・精製【緒方訓子】
3.酵素消化とペプチドの単離・精製−質量分析用試料の調製【長野光司】
4.質量分析による同定【長野光司】
5.シークエンスによる同定【長野光司】
6.ペプチドの精製【大日向耕作,吉川正明】
第4章 組換えタンパク質の発現と精製のコツ
1.発現系の選択【本庄栄二郎,黒木良太】
2.タンパク質発現系−大腸菌コールドショックベクター【小堀博史,高蔵 晃】
3.タンパク質発現系−発現クローンの構築:Gateway®/MultiSite Gateway®法【矢幡一英,曽根岳史,今本文男】
4.タグ付き組換えタンパク質の発現と精製【小堀博史,高蔵 晃】
5.組換えタンパク質の発現【本庄栄二郎,黒木良太】
6.組換えタンパク質の精製【本庄栄二郎,黒木良太】
7.分解や封入体への対応【本庄栄二郎,黒木良太】
8.タグ付き組換えタンパク質の検出【森山達哉】
第5章 抗体作製と使用のコツ
1.抗体作製の目的と手順【森山達哉】
2.モノクローナル抗体作製法【片岡千和】
3.抗体精製方法【稲川淳一】
付録:タンパク質研究に便利なツール,委託抗体作製等の情報【森山達哉】
索引
- 実験をするにあたって、実践的な部分が多く取り上げられているとともに、方法の原理や背景等の情報も盛り込まれていて、初心者以外にも勉強になる構成だった。
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- 【本書名】実験医学別冊:バイオ実験で失敗しない! タンパク質精製と取扱いのコツ〜抽出・精製・組換えタンパク質発現・抗体作製の実践的ノウハウと、最適な試薬・機器の選択&活用法
- 【出版社名】羊土社
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(2021年8月23日)
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