クローズアップ実験法

2023年11月号 Vol.41 No.18 詳細ページ
安価なヒト小腸上皮オルガノイドの培養方法
高橋　裕，佐藤隆一郎
363 安価なヒト小腸上皮オルガ ノイドの培養方法 高橋 裕,佐藤隆一郎 何ができるようになった? ヒト小腸オルガノイドは幅広い研究分野での活用が期待されるが,非常に高い培養コストが難点で あった.高額な増殖因子の安定発現細胞と安価なコラーゲンゲルの使用により,従来の約 1/100 ま でコストを削減できた. 必要な機器・試薬・テクニックは? 安定発現細胞の作製に必要なレンチウイルスベクターは理研 BRC やサーモフィッシャーサイエン ティフィック社より入手可能である.コラーゲンゲルは新田ゼラチン社などから入手できる.P2 レ ベルの実験室が必要となる. はじめに は,ヒト小腸オルガノイドを用いた研究を継続的に行 オルガノイドは臓器・組織特異的な幹細胞とその分 ううえで,解決すべき重要な課題である. 化細胞から構成される三次元の集合体であり,臓器に 類似した性質を示すこと,実験動物への移植により機 能的な臓器を形成することから ,高度に生理的な 原理 モデルであるとされる 1).その中でも,小腸上皮 マウス (2009 年)4)およびヒト小 腸 オルガノイド オルガノイド(以下,小腸オルガノイド)は最も古く (2011 年)5)での報告を皮切りに,全身のさまざまな臓 から研究が進められており,特にヒト小腸オルガノイ 器・組織オルガノイドの培養法がこれまでに開発され ドは従来の培養モデルでは再現困難な生理機能を示す てきた.その中で,細胞外基質を含むゲルの中にオル ことから 2)3),基礎・応用に限らずさまざまな研究分野 ガノイドを包埋し ,さまざまな増殖因子を含む培地を での活用が期待されている.しかし,その培養にはさ 満たすという方法は ,最も標準的なオルガノイドの培 まざまな増殖因子やマトリゲルなどの細胞外基質を含 養法として確立されている(図 1) .ヒト小腸オルガノ むゲルが必要となり,これらをすべて市販品で賄う場 イドの場合 ,マウス肉腫から抽出したマトリゲルに包 合,24 ウェルプレート 1 枚分の培養で約 20 万円(定価 埋し,Wnt3a,R-spondin1,Noggin(合わせて WRN) ベース)もの高額な費用を要する.培養コストの削減 を含む増殖用培地を用いる方法が広く行われている . A cost-effective method for culturing human small intestinal organoids Yu Takahashi/Ryuichiro Sato:Department of Applied Biological Chemistry, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo(東京大学大学院農学生命科学研究科応用生命化学専攻) 実験医学 Vol. 41 No. 18(11 月号)2023 3035
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