無敵のバイオテクニカルシリーズ

改訂第3版　バイオ実験の進めかた

佐々木博己／編

2007年03月20日発行
A4判
200ページ
ISBN 978-4-89706-923-4

4,620円（本体4,200円＋税）
在庫：あり

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さあ実験，でもどう進めたらいいのだろう…と悩む前に本書をどうぞ！バイオ研究の流れをフローチャートで示し，流れに沿って200以上の実験法を紹介．キット・受託情報も充実で，効率よく実験できます！

■目次詳細を表示する

1章　遺伝子クローニングと入手方法【佐々木博己】

A.通常のcDNAクローニングと入手方法

A-1. cDNAライブラリーからcDNAを手に入れる

mRNAを調製する
cDNAライブラリーの作製とスクリーニング

A-2. PCRによってcDNAを手に入れる

A-3. 公的保存施設からの譲渡，市販のカタログショッピング

公的遺伝子供給施設
市販のカタログショッピング

A-4. 人からの供与

B.遺伝子の発現量や機能をもとにしたクローニング

B-1. 合成オリゴヌクレオチドによるcDNAライブラリーのスクリーニング

B-2. mRNAの発現量の差をもとにcDNAを手に入れる

cDNAディファレンシャルハイブリダイゼーション法
cDNAサブトラクション法
mRNAフィンガープリント法

B-3. cDNAの発現クローニング

抗体をプローブとするcDNAクローニング
細胞にmRNAやcDNAを導入して目的のcDNAのみを分離する
タンパク質-タンパク質相互作用を利用してcDNAを手に入れる
DNA-タンパク質相互作用を利用してcDNAを手に入れる

C.同定したcDNAの塩基配列の決定とホモロジーサーチ

C-1. 塩基配列の決定

キャピラリー電気泳動方式
スラブゲル電気泳動方式

C-2. ホモロジー検索

核酸，アミノ酸のデータベースと検索プログラム
モチーフデータベース

2章　抗体の入手，タンパク質の精製とアミノ酸配列決定【吉田　真太郎】

A．抗体を入手する

A-1. 抗体を購入する

A-2. 抗体を作製する

ポリクローナル抗体
モノクローナル抗体

B．タンパク質の精製とアミノ酸配列決定

B-1. 生体，細胞からタンパク質を手に入れる

タンパク質を分画する
タンパク質を分離・精製する

B-2. アミノ酸配列（一次構造）の決定

アミノ酸配列分析用タンパク質の調製
アミノ酸配列（一次構造）決定

3章　遺伝子産物の生化学的解析【吉田　真太郎】

A．タンパク質の酵素活性を解析する

A-1. タンパク質の入手

A-2. 酵素活性を測定する

キナーゼ活性測定
その他の活性測定

B．タンパク質の局在性の検定を行う

B-1. 免疫染色法（免疫組織化学染色法）

免疫染色法の種類
標識物質

B-2. 免疫電顕法

B-3. GFPを利用した局在性検

C．タンパク質-タンパク質の相互作用を調べる

C-1. 融合タンパク質を用いて目的のタンパク質の検出を行う

融合タンパク質の作製
融合タンパク質の精製

C-2. 抗体を用いて目的のタンパク質の検出を行う

合成ペプチドを利用した抗原の作製
目的タンパク質の検出

C-3. 表面プラズモン共鳴法

C-4. 蛍光共鳴エネルギー転移（FRET）法

C-5. プロテオーム解析

D．DNA-タンパク質の相互作用を調べる

D-1. DNA結合因子の解

D-2. DNA非結合因子の解析

D-3. クロマチン免疫沈降（ChIP）法

E．タンパク質の修飾を解析する

E-1. リン酸化の解析

リン酸化タンパク質の検出
リン酸化アミノ酸の分析

E-2. タンパク質に付加した複合糖鎖の解析

糖タンパク質の分離・精製
糖鎖の切断
糖鎖の同定

E-3. その他の翻訳後修飾の解析

4章　遺伝子の発現解析【落谷孝広】

A．目的のmRNAの発現している組織，細胞，量，それに時期，期間を知る

A-1. cDNAセットの購入

A-2. mRNAフィルター，ポリA mRNAアレイの購入

A-3. mRNAの抽出方法

A-4. 発現情報解析の方法：核酸レベル

ノーザンハイブリダイゼーション法
RNaseプロテクションアッセイ法（リボプローブマッピング）
RT-PCR法
リアルタイムPCR法
DNAチップ/マイクロアレイ法

A-5. 発現情報解析の方法：細胞・組織レベル

in situハイブリダイゼーション（ISH）法
in situ RT-PCR法
核run-onアッセイ法
マイクロダイセクション法
組織アレイによる遺伝子発現解析法

B．目的のmRNAの発現調節機構を調べる

B-1. 発現はどのレベルで調節されているのかを知る

転写レベルでの調節
転写後の各段階で調節されている場合

B-2. 発現調節領域の同定

プロモーター解析
エンハンサーの同定
in vitro転写系

B-3. 転写後の調節機構を知る

microRNA による発現調節を知る

B-4. エピジェネティクスによる遺伝子発現調節

C．転写制御因子を解析する

C-1. 転写因子の解析

C-2. 転写因子の精製

C-3. 目的遺伝子と転写因子の相互作用

チロシンリン酸化抗体による解析方法
In-gelタンパク質リン酸化アッセイ法
レポーターアッセイシステム（キット）

5章　細胞・生体レベルの遺伝子機能解析【落谷孝広】

A．培養細胞への遺伝子導入と発現

A-1. 人工変異の導入方法

合成オリゴヌクレオチドによる位置指定変異導入法
領域指定変異導入法

A-2. 発現ベクターのデザイン

プロモーター・エンハンサーの選択
発現調節用ベクターの選択

A-3. 培養細胞への遺伝子導入の方法論

生物学的方法
物理的方法
化学的方法

A-4. 遺伝子組み込み細胞株の樹立

選択マーカー遺伝子の選択
薬剤耐性細胞株の樹立
遺伝子発現細胞株のスクリーニング

A-5. レポーター遺伝子導入と発現アッセイ法

B．オリゴヌクレオチドの導入による遺伝子の機能解析

B-1. アンチセンスオリゴヌクレオチドのデザインと全体のプロトコール

ターゲット部位デザイン
プロトコール

B-2. 培養細胞へのアンチセンスオリゴヌクレオチドの導入

B-3. RNAi法のデザイン

標的遺伝子に対するsiRNAの配列設計
siRNA配列の特異性の確認
合成siRNAか，ベクター型siRNAかの選択
細胞，動物への導入

C．動物個体への遺伝子導入

C-1. トランスジェニック

トランスジェニック動物作製
各種トランスジェニック動物

C-2. ノックアウト

ノックアウトマウス作製
その他のノックアウト動物
その他の個体レベルでの遺伝子機能の抑制方法：RNAi法

C-3. 生体への全身あるいは局所的遺伝子導入法

C-4. 個体レベルでのイメージング解析

D．動物個体の大量変異株のバンク状況と取得のための利用法

6章　幹細胞（ES細胞.間葉系幹細胞）を用いた実験法【落谷孝広】

A．ES細胞の樹立と培養，保存などの基礎技術

A-1. ES細胞の取り扱い

ES細胞の入手
ES細胞の培養
ES細胞の保存
フィーダー細胞の取り扱い

A-2. ES細胞への遺伝子導

ES細胞に導入可能な遺伝子ベクター
遺伝子導入の方法

A-3. ヒトES細胞の入手などについての情報

B．ES細胞の分化誘導系を用いた遺伝子機能解析

B-1. ES細胞を用いた遺伝子機能解析の戦略

B-2. ES細胞のin vitro分化誘導

培養シャーレ上での分化誘導
胚様体を介したin vitro分化誘導

B-3. ES細胞のin vivo分化誘導

C．間葉系幹細胞

C-1. 間葉系幹細胞の入手

C-2. 間葉系幹細胞の培養

C-3. 間葉系幹細胞の分化

7章　ポストゲノムとしての網羅的遺伝子研究【佐々木博己】

A．癌を含む疾患原因遺伝子の分離・同定

A-1. ポジショナルクローニングによる遺伝性疾患の原因遺伝子の同定

古典的な多型マーカーを用いた連鎖解析による原因遺伝子座の決定
SNPsを利用した疾患関連遺伝子の同定

A-2. ポジショナルクローニングによる非遺伝性の癌の原因遺伝子の同定

染色体の構造異常の同定
染色体の転座・逆位部位の同定
メチル化異常の同定

A-3. 候補遺伝子の同定

データベースを利用する方法
実験的に未知遺伝子を分離する方法

A-4. 遺伝子変異の同定

大きな変化を検索する方法
点突然変異を含む微細な変化を検索する方法

B．ゲノム網羅的遺伝子機能解析

B-1. トランスクリプトーム関連技術

B-2. プロテオーム関連技術

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【本書名】無敵のバイオテクニカルシリーズ：改訂第3版　バイオ実験の進めかた
【出版社名】羊土社

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